A soros hígítás elvégzése

Tartalom

• szakaszában
• 1. módszer Végezzen el egy egyszerű hígítást
• 2. módszer Számítsa ki a végső hígítási tényezőt és a koncentrációt

A kémiában a hígítás az adott oldat koncentrációjának csökkentéséből áll. A soros hígítás egyszerűen az eredeti oldat ismételt hígítása, hogy a hígítási tényező gyorsan fokozódjon. Az ilyen típusú hígítást gyakran olyan kísérletek során hajtják végre, amelyek nagymértékben hígított oldatokat és nagy pontosságot igényelnek, például azokban, amelyekben log-skálán szerepelnek a koncentrációgörbék, vagy amelyek lehetővé teszik a baktériumok sűrűségének kiszámítását bizonyos közegekben. Nagyon gyakran végeznek biokémiai, mikrobiológiai, farmakológiai vagy kémiai területeken.

szakaszában

1. módszer Végezzen el egy egyszerű hígítást

1. 
   

   
   Határozza meg a megfelelő hígító folyadékot (vagy hígítót). A hígítószer kiválasztása nagyon fontos, és attól függ, hogy milyen oldatot kíván hígítani. A hígítószer gyakran desztillált víz, de ez nem szisztematikus. Tehát baktériumokat vagy sejteket tartalmazó oldattal inkább táptalajot használunk. A soros hígításhoz ugyanazt a hígítót kell használni minden csőben.
   • Ha nem biztos benne, melyik hígítószert használja, kérjen segítséget hozzáértő személytől, vagy keresse meg az interneten, mit kell tennie az embereknek hasonló élményért.

2. 
   

   
   
   
   Készítsen több kémcsövet, amely 9 ml hígítófolyadékot tartalmaz. Ezeket a kémcsöveket felhasználják egymást követő hígítások készítésére. Az elv egyszerű, mintát vesz a kiindulási oldatból, és átviszi a következő csőbe, majd mintát vesz ebből a csőből, hogy a következőbe tegye stb.
   • A hígítás megkezdése előtt tanácsos előre meghatározni a kémcsöveket, hogy elkerülhető legyen a későbbi összetévesztés.
   • Minden csőben tíz koncentrációval alacsonyabb lesz az előzőnél megadott koncentráció. Az első cső hígított oldatot tartalmaz a tizedik, második, századik, harmadik, ezredikben és így tovább. Előzetesen határozza meg a hígítások számát, hogy elkerülje a szükségesnél több cső előállítását, és szükségtelenül pazarolja a hígítószert.

3. 
   

   
   
   
   Készítsen egy kémcsövet anyai oldattal. Töltsön be legalább 2 ml-t. A soros hígításhoz szükséges törzsoldat minimális mennyisége egy milliliter. Hagyja 2 ml-t a lehetséges második hígításig. Ez az anyaoldat-cső, "SM" -vel jelölhető meg.
   • A soros hígítás megkezdése előtt alaposan keverjük össze a kiindulási oldatot.

4. 
   

   
   Végezzük el az első hígítást. Pipettázzunk 1 ml törzsoldatot az "SM" feliratú kémcsőbe, és töltsük át ezt a mennyiséget a jelölt kémcsőbe. 1/10 amely már tartalmaz 9 ml hígító folyadékot. Keverjük össze, hogy homogén oldatot kapjunk. Ebben a csőben 10 ml oldat van: 1 ml törzsoldat és 9 ml hígító folyadék. Ez az új megoldás tízszer kevésbé koncentrált, mint az előző.

5. 
   

   
   Végezzük el a második hígítást. A második sorozatos hígítás során 1 ml-t fog felvinni a jelölt csőoldatból 1/10 és öntsük a csőbe 1/100 amely már tartalmaz 9 ml hígító folyadékot. A cső 1/10 a mintavétel előtt jól össze lesz keverve. Miután a transzfer befejeződött, alaposan keverje össze a csövet 1/100. Az oldat a megjelölt csőből 1/10 tízszer koncentráltabb, mint a jelölt csőé 1/100.

6. 
   

   
   Ha szükséges, ismételje meg ezt a műveletet. Ez az eljárás a kívánt hányszor megismételhető, amíg a kívánt hígítás meg nem valósul. A koncentrációgörbéket magában foglaló kísérlethez így egy sorozat oldatot kaphat az egység hígításával: a tizedik (1/10), a századik (1/100) vagy a ezredik (1/1000).

2. módszer Számítsa ki a végső hígítási tényezőt és a koncentrációt

1. 
   

   
   Számítsa ki a arány a soros hígítás utáni végső hígítás. A hígítás teljes hányadosa úgy érhető el, hogy a hígítási tényezőt megszorozzuk önmagával, hányszor vannak hígítások. Matematikailag a képlet a következő: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_na D_t a teljes hígítási tényezőt képviselik, és D_n, a hígítás aránya.
   • Tegyük fel, hogy egy folyadék 1/10-os hígítását hajtja végre egymás után négyszer. A képletben cserélje ki a hígítási tényezőt az alábbi értékre: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
   • A sorozatos hígítás során a negyedik cső végső hígítási tényezője 1/10 000. Az utolsó cső oldatának koncentrációja most 10 000-szer alacsonyabb, mint az eredeti oldat koncentrációja.

2. 
   

   
   Határozzuk meg az oldat koncentrációját hígítás után. A soros hígítás utáni oldat végső koncentrációjának meghatározásához meg kell ismernie a kiindulási koncentrációt. A képlet ezután: C_utolsó = C_kezdeti/ Aa C_utolsó a hígított oldat végkoncentrációját képviseli, C_kezdeti, a törzsoldat koncentrációja és D, a hígítás aránya előre meghatározva.
   • Tehát, ha egy sejtoldatot 1 000 000 sejt / ml koncentrációval hígítunk, és a hígítási arányt 1000-re állítottuk, akkor mi lesz a hígított minta végső koncentrációja?
   • Használja a következő képletet:
     • C_utolsó = C_kezdeti/ A
     • C_utolsó = 1 000 000/1 000
     • C_utolsó = 1000 sejt / ml

3. 
   

   
   Ügyeljen a használt egységekre. A számítások elvégzésekor mindig ellenőrizze, hogy ugyanazokat az egységeket használja-e. Tehát, ha a sejt / ml koncentrációt vesszük alapul, akkor a végeredmény a sejtek / ml-ben is lesz. Ha a kiindulási koncentráció egy millió részre esik (ppm), akkor a végleges koncentráció egy millió részre esik.